本发明提供一种表达羊种布氏菌P39基因的rBCG，其是将携带有经过密码子优化的羊种布氏菌P39基因的表达载体转入BCG中构建得到的。由布氏菌产生的胞质结合蛋白PBP39(编码基因为P39)是一种T细胞抗原。卡介苗BCG是迄今唯一商品化的预防结核的疫苗。研究证实BCG不仅具有显著的免疫佐剂效应，而且是一种性能良好、安全性很高的外源基因表达宿主。利用BCG表达经过密码子优化的布氏菌P39基因既可以提高P39基因的表达量，构建得到的rBCG疫苗又能够模拟布氏菌胞内感染与寄生的特性，更有效地诱导机体产生免疫应答，还能发挥BCG作为表达宿主的高安全性、制备简单、成本低廉等优点以及BCG本身所具有的免疫佐剂效应，有望成为新型的布鲁氏菌病疫苗。
1.表达羊种布氏菌P39基因的rBCG在制备布鲁氏菌病疫苗中的应用，所述布鲁氏菌病疫苗诱导IL-2、IL-12和IFN-γ细胞因子的产生； 其中，所述表达羊种布氏菌P39基因的rBCG的构建方法包括以下步骤： 1)根据已公开的羊种布氏菌M5株P39基因序列，采用Jcat软件进行密码子优化后，人工合成全序列优化后的P39基因作为目的基因； 2)携带有优化后的羊种布氏菌P39基因的重组表达载体的构建：将上述目的基因通过PvuⅡ和EcoRⅠ两个酶切位点插入穿梭表达载体pMV361中； 3)宿主菌转化：将步骤2)构建得到的重组表达载体转化至BCG中，筛选阳性克隆，即得可分泌表达羊种布氏菌P39基因的rBCG； 优化后羊种布氏菌P39基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述重组表达载体的核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
请联系平台
请联系平台
