一种用于质粒DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体及其制备方法。组装体构筑单元为金刚烷修饰透明质酸和四乙烯五胺修饰环糊精,通过环糊精和金刚烷之间的主客体作用构筑具有透明质酸酶响应性的聚多糖超分子组装体,组装体粒径为100nm左右。本发明的优点是:1)引入透明质酸和β‑环糊精可有效提高组装体的水溶性和生物相容性;2)组装体可以将多胺链聚集在一起,增强其对质粒DNA的作用,从而提高了其对质粒DNA的包裹能力;3)将透明质酸–透明质酸酶这一对响应体系成功应用于酶促响应纳米组装体的构建,可实现可控的质粒DNA的包裹和释放;4)该组装体构筑方法简单、易于实施且原料成本低,使其在基因递送领域具有很好的应用前景。
1.一种用于质粒DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体,其特征在于以四乙烯五胺修饰环糊精TEPA-CD为主体,以金刚烷修饰透明质酸HA-ADA为客体,通过超分子主客体作用构筑的具有透明质酸酶响应性的聚多糖超分子组装体并可有效的负载质粒DNA和实现可控释放;其中四乙烯五胺修饰环糊精TEPA-CD的分子式为C46H81N3O34,金刚烷修饰透明质酸HA-ADA平均一条高分子链上连接178.17个金刚烷单元,该组装体构筑单元的结构如下:
2.根据权利要求1所述用于质粒DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体,其特征在于,组装体粒径为100nm。
3.一种权利要求1所述用于质粒DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体的制备方法,其特征在于,将金刚烷修饰透明质酸HA-ADA和四乙烯五胺修饰环糊精TEPA-CD按照摩尔比为1:178.17混合在一起,用超纯水溶解即得用于质粒DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体。
4.根据权利要求3所述用于DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体的制备方法,其特征在于,金刚烷修饰透明质酸HA-ADA和四乙烯五胺修饰环糊精TEPA-CD的浓度分别为0.0768mM和13.6696mM。
5.一种权利要求1所述用于DNA控释的酶响应聚多糖超分子组装体的应用,其特征在于,用于非疾病的诊断与治疗目的的负载质粒DNA将其运送到细胞中并利用透明质酸酶实现质粒DNA的可控释放。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,具体应用方法为:将制得的组装体和质粒DNA分别溶于水中得到浓度为0.0768mmol/L的组装体溶液和浓度为0.12μg/μL的质粒DNA溶液,将20μL组装体溶液与20μL质粒DNA溶液混合,混合液中的氮/磷比为80,振荡5秒钟后,室温下静置30min,制得负载了质粒DNA的组装体溶液;然后,向负载了质粒DNA的组装体溶液中加入2429IU透明质酸酶,并在37℃的水浴环境下搅拌孵育2.5小时,即能够实现质粒DNA的释放。
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