本发明提供一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,基于荨麻多糖的特点,对超声参数、复合酶的组成、多糖的纯化等提取工艺进行优化调整,利用超声波的空化作用对原料进行破碎,加速多糖的溶出,再结合多种复合酶对细胞壁的破坏作用,加速多糖的溶出;同时,由于超声波的次级效应如机械振动、乳化等能够加速多糖在水中的分散,利于提取,获得了一种能够提高多糖产率、保证多糖活性的提取荨麻多糖的方法。
1.一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:包括以下步骤: (1)将荨麻全草清洗晾干后粉碎,过100-200目标准筛,用脱脂剂加热回流1-3h,过滤,取滤渣干燥备用; (2)将步骤(1)得到的荨麻滤渣浸泡于15-25倍重量的水中,调节pH值为4-6,温度为50-55℃,超声破壁处理10-30min,超声波功率为500-800w; (3)调整步骤(2)超声处理后溶液的pH值为4-6,加入0.5-1wt%的果胶酶,温度为50-60℃下酶解30-50min,酶解过程中施加超声波处理,超声波功率120-200w; (4)调整步骤(3)处理后溶液的pH值为5-8,加入3-6wt%的复合酶,所述复合酶由质量比1:1:1的纤维素酶、木瓜酶和胰蛋白酶混合而成,温度为50-60℃下酶解40-60min,酶解过程中施加超声波处理,超声波功率120-200w;高温灭酶后,过滤取滤液制备得到多糖粗提物; (5)将步骤(4)得到的多糖提取物用90-95wt%的乙醇沉淀,采用sevage法脱蛋白2-4次,经高速离心分离后,浓缩,冷冻干燥得到荨麻多糖。
2.根据权利要求1所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述荨麻为麻叶荨麻、狭叶荨麻、西藏荨麻、异株荨麻、裂叶荨麻、小果荨麻、粗根荨麻的一种。
3.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述脱脂剂选自石油醚、乙醇、乙酸乙酯的一种或多种。
4.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)-(4)中调节pH值时均选用醋酸-醋酸钠,磷酸氢二钠-磷酸二氢钠的缓冲盐溶液。
5.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中的pH值优选为5。
6.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中的pH值优选为6-7。
7.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中高速离心的转速为3500-5000r/min。
8.根据权利要求1-2任一项所述的一种超声辅助复合酶提取荨麻多糖的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中,在酶解结束后,提高超声波功率至500-800W,继续超声提取10-20min。
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