本发明公开了一种用于检测沙柳木蠹蛾的引物探针组、试剂盒及检测方法。引物探针组包括：上游引物A、下游引物A及探针，所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO2所示，所述探针A的核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。本发明通过对沙柳木蠹蛾基因的特定区域设计引物探针组，制作用于检测沙柳木蠹蛾的试剂盒，通过将含有沙柳木蠹蛾COI基因DNA片段作为荧光PCR检测的靶序列，进行荧光PCR检测，成功建立了沙柳木蠹蛾基因快速检测体系，其操作简单，能实现沙柳木蠹蛾的精准检测。
1.一种用于检测沙柳木蠹蛾的引物探针组，其特征在于所述引物探针组包括：上游引物A、下游引物A及探针，所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO2所示，所述探针A的核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。
2.一种用于检测沙柳木蠹蛾的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括上游引物A、下游引物A、探针A、ddH2O及DNA聚合酶，以上材料分别封装于不同的容器内；所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID NO2所示，所述探针A的核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。
3.根据权利要求2所述的用于检测沙柳木蠹蛾的试剂盒，其特征在于：还包括阴性对照引物对，所述阴性对照引物对包括上游引物B和下游引物B，上游引物B和下游引物B分别封装于不同的容器内，所述上游引物B的核苷酸序列如SEQ ID NO4所示，所述下游引物B的核苷酸序列如SEQ ID NO5所示。
4.一种沙柳木蠹蛾的荧光定量PCR检测方法，其特征在于包括以下步骤： 1）提取待测模板DNA； 2）提取完成后，对权利要求3所述试剂盒的上游引物A、下游引物A进行阳性对照实验，通过待测模板DNA、上游引物A、下游引物A、ddH2O及DNA聚合酶建立PCR扩增体系扩增，电泳凝胶结果为阳，表明对靶基因的检测系统是正常的；凝胶结果为阴时，表明该次实验无效； 3）采用阴性对照引物对的上游引物B和下游引物B对待测模板DNA进行检测，通过待测模板DNA、上游引物B、下游引物B、ddH2O及DNA聚合酶建立PCR扩增体系扩增，电泳凝胶无条带，结果为阴，表明对靶基因的检测系统是正常的，本次试验无污染；凝胶有条带，结果为阳，表明该次实验无效，需重复； 4）采用检测引物探针组进行荧光定量PCR实验； 5）根据质控标准分析步骤4）的检测结果；若待测模板的扩增显示阳性扩增曲线，则含有沙柳木蠹蛾；反之，则没有沙柳木蠹蛾。
5.根据权利要求4所述的沙柳木蠹蛾的荧光定量PCR检测方法，其特征在于：所述步骤4）的扩增循环步骤为：第一阶段，95℃、2分钟；第二阶段，95℃、3s；第三阶段，60℃、30s；循环40次。
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