政策资讯

一种检测布鲁菌感染的预处理试剂盒及其应用

专利类型:
发明
申请号/专利号:
CN201710961765.5
申请人(专利权人):
内蒙古民族大学
行业类别:
C12Q1/689 C12Q1/04 C12R1/01
技术成熟度:
成熟
公布时间:
2019-11-22
证书状态:
有效
交易价格:
面议
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技术摘要

权利要求书

技术附图

交易流程

委托经理人

本发明提供了一种检测布鲁菌感染的方法,即血清血细胞同步检测法。该检测法包括血清样本检测与活的血细胞样本检测两种操作步骤和一个配套试剂盒。此试剂盒可用于临床体外检测布鲁菌的血液样本前处理。血清血细胞同步检测法可用于布鲁菌感染早期临床快速诊断和治疗过程中指导用药,还可用于预后判定和布病流行病学调查等方面。本发明还可用于其他胞内寄生菌感染的早期临床快速诊断。

1.预处理试剂盒在制备用于检测布鲁菌感染的方法的试剂产品中的应用,其中,所述试剂盒检测血清布鲁菌DNA和检测血细胞布鲁菌DNA,其中,所述试剂盒由分别装有SolutionⅠ、SolutionⅡ、SolutionⅢ、SolutionⅣ和SolutionⅤ的容器组成,其中,SolutionⅠ为368mg/42mL氯化钠的水溶液; SolutionⅡ为1g/125mL氯化钠、25mg/125mL氯化钾、177.5mg/125mL磷酸氢二钠和33.75mg/125mL磷酸二氢钾的水溶液; SolutionⅢ为42.399mg/35mL三羟甲基氨基甲烷、306.81mg/35mL氯化钠和102.284mg/35mL乙二胺四乙酸的水溶液; SolutionⅣ为Triton X-100或为35mg/0.35mL十二烷基硫酸钠的水溶液; SolutionⅤ为双蒸水。

2.权利要求1所述的应用,其中,血清和血细胞是同一布鲁菌感染者的同一次采取的外周血中的血清和外周血中活的单核细胞。

3.权利要求1所述的应用,其中,检测血清布鲁菌DNA包含以下操作步骤:取0.2mL血清于1.5mL Ep管中;室温,15000×g,离心15分钟;弃上清;加SolutionⅤ0.2mL于1.5mL Ep管中;震荡;室温,15000×g,离心10分钟;弃上清;加SolutionⅤ20μL于1.5mL Ep管中;震荡,瞬间离心;100℃,加热10分钟;置于冰中或-20℃冰箱中2分钟;室温,15000×g,离心10秒钟;吸取15或10μL上清液做模板,进行PCR反应。

4.权利要求1所述的应用,其中,检测血细胞布鲁菌DNA包含以下操作步骤:取1mL外周血;加SolutionⅠ1mL混匀;平铺到6孔细胞培养板上;37℃孵育1小时;弃掉上清液,用SolutionⅡ洗净至无红色;加SolutionⅡ1mL于细胞培养板孔内,反复吹打,洗下孔底部的沉淀物至1.5mL Ep管中;4℃500×g离心5分钟;弃上清;加SolutionⅢ800μL,充分混匀;加SolutionⅣ8μL,充分混匀;55℃孵育1小时;室温,8000rpm离心10分钟;弃上清;加SolutionⅤ800μL,充分混匀;室温,8000rpm离心10分钟;弃上清;加SolutionⅤ20μL,震荡,充分混匀;100℃,加热10分钟;室温,15000×g,离心10秒钟;吸取15或10μL上清液做模板,进行PCR反应。

5.权利要求3或4所述的应用,其中,PCR是荧光定量PCR。

6.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于布鲁菌感染早期临床快速诊断的试剂产品。

7.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于布病治疗过程中用药指导和药物疗效判定的试剂产品。

8.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于布病的预后判定的试剂产品。

9.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于布病流行病学调查的试剂产品。

10.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于进行布鲁菌的科学研究的工具。

11.权利要求1所述的应用,其中,所述试剂盒用于制备用于牧区农牧民的健康体检的试剂产品。


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