本发明公开了一种2605bp长的RcFAH12启动子及其缺失突变片段，所述RcFAH12启动子及缺失突变片段的获得方法包括以下步骤：将全基因合成的RcFAH12启动子‑2506～+99bp序列，连入pUC57质粒载体中得到质粒pUC57‑RcFAHP2605，并以质粒pUC57‑RcFAHP2605为模板，分别以对应的T/B引物对进行PCR扩增，得到10个启动子缺失突变片段，经PCR扩增、纯化、连接，成功构建含不同RcFAH12基因启动子缺失克隆的表达载体，并通过拟南芥遗传转化，利用农杆菌介导的蘸花法侵染拟南芥，得到T3代转基因拟南芥，对T3代转基因拟南芥组织进行GUS染色分析，得出不同长度的RcFAH12基因启动子表现出不同的启动表达活性，包括具有组成型启动表达、种子相对特异性表达、花粉特异性表达，在植物基因工程育种中具有重要应用价值。
1.一种RcFAH12启动子缺失突变片段，其特征在于，所述RcFAH12启动子缺失突变片段为RcFAHP2605、RcFAHP2159、RcFAHP1611、RcFAHP1178、RcFAHP677、RcFAHP256、RcFAHP494、RcFAHP584、RcFAHP502、RcFAHP613，其对应的核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2、SEQ ID No.3、SEQID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7、SEQ ID No.8、SEQ IDNo.9、SEQ ID No.10。
2.如权利要求1所述的一种RcFAH12启动子缺失突变片段在植物功能基因研究或在植物基因工程育种中作为启动子的应用。
3.根据权利要求2所述的RcFAH12启动子缺失突变片段在植物功能基因研究或在植物基因工程育种中作为启动子的应用，其特征在于：将10个启动子缺失克隆片段连入由pCAMBIA1303 Pst I/Nco I双酶切的载体中，构建由10个缺失突变启动子替换原有35S启动子的表达载体，并利用蘸花法侵染拟南芥进行遗传转化，在浓度为50mg/L潮霉素抗性筛选下，得到T3代转基因拟南芥，并对T3代转基因拟南芥组织进行GUS染色分析。
4.根据权利要求3所述的RcFAH12启动子缺失突变片段在植物功能基因研究或在植物基因工程育种中作为启动子的应用，其特征在于：所述缺失突变片段在种子中高强度特异性表达的启动子有RcFAHP2605、RcFAHP1611、RcFAHP256、RcFAHP502和RcFAHP613，并且所述RcFAHP2605在叶片中也呈现高强度表达。
5.根据权利要求4所述的RcFAH12启动子缺失突变片段在植物功能基因研究或在植物基因工程育种中作为启动子的应用，所述RcFAHP1611启动子可启动GUS在花萼、花瓣、花丝、柱头中高强度表达；所述RcFAHP2605启动子可启动GUS基因在花萼、柱头及花药中低强度表达。
请联系平台
请联系平台
